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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2019-92
培養(yǎng)細(xì)胞是醫(yī)學(xué)研究生的基本功。細(xì)胞嬌貴，一不小心容易出問題。作為新手培養(yǎng)細(xì)胞要注意那些呢。1、不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)...
查看更多2019-830
細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染1.細(xì)胞培養(yǎng)(HEK293T)1)顯微鏡下觀察細(xì)胞，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，去上清；2)加入預(yù)熱的PBS3ml,溫柔地清洗細(xì)胞,棄去PBS；3)用胰蛋白酶消化細(xì)胞，通常75cm2培養(yǎng)瓶的貼壁細(xì)胞用3ml胰蛋白酶于37oC處理5min；4)待細(xì)胞脫落后，加入5mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)以終止消化反應(yīng)，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入15ml或50ml離心管中；5)1000rpm離心5min，去除上清；6)加入10mlDMEM培養(yǎng)液(含10%FBS)，重新懸浮細(xì)胞，使細(xì)胞充分...
查看更多2019-829
（一）無菌操作前的準(zhǔn)備工作培養(yǎng)材料接種時(shí)的無菌操作過程除上述各項(xiàng)操作外，還需完成以下無菌操作步驟，從而獲得接種的無菌培養(yǎng)材料。工作人員無菌操作前需用肥皂刷洗雙手及手臂，并用流水沖凈，并對(duì)手臂**后穿戴好**工作服、工作帽和口罩，更換拖鞋，才能進(jìn)入無菌操作區(qū)。如進(jìn)入層流操作室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，應(yīng)完成緩沖準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)的淋浴、一次更換**衣帽、拖鞋；手臂**、二次更換**防護(hù)衣帽、手套、拖鞋等；再在風(fēng)淋區(qū)進(jìn)行無菌風(fēng)淋后方可進(jìn)入層流操作室。進(jìn)入無菌操作區(qū)后，再用70%～75%的酒精擦拭雙手和...
查看更多2019-828
培養(yǎng)基滅菌是否*，直接影響科研檢測(cè)數(shù)據(jù)，影響培養(yǎng)基滅菌的因素很多，除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量，滅菌時(shí)間長(zhǎng)短和溫度高低，還取決于以下幾點(diǎn)營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時(shí)，微生物被殺死的同時(shí)，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。微生物的耐熱性細(xì)...
查看更多2019-827
近來，國家的干細(xì)胞的政策是一個(gè)接一個(gè)。對(duì)應(yīng)的，來自用戶的咨詢也是一個(gè)接一個(gè)。大多數(shù)的問題是：現(xiàn)在都在說無血清培養(yǎng)基，無血清培養(yǎng)基和血清培養(yǎng)基到底有什么差別？差別很大，從用途方面簡(jiǎn)單說下你感受的可能更具體。如果你是提供間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）藥物的，差別在于：1.你拿到產(chǎn)品注冊(cè)證的可能性更大、需要提供的資料更少、花的時(shí)間更少。2.你的干細(xì)胞產(chǎn)品更安全。3.你的干細(xì)胞產(chǎn)品性能更*。4.你的干細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量更穩(wěn)定。5.你的細(xì)胞產(chǎn)品干性更好。如果你是做間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）存儲(chǔ)與應(yīng)用的，...
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